Перегляд вихідного коду сторінки Отримання культури «бородатих» коренів полину звичайного з геном ifn-α2b людини / Дробот К.О. та ін. 2015

[[Дробот К.О.]], [[Шаховський А.М.]], [[Матвєєва Н.А.]]

Полин здавна використовується у народній та традиційній медицині. Зокрема, це обумовлено наявністю у хімічному складі рослин ефірних олій, аскорбінової кислоти, флавоноїдів та сесквітерпенових сполук (у тому числі артемізиніну).

[[Image:Отримання культури «бородатих»... 2015 Рис 1.jpg|450px|thumb|Рис.1. Електрофореграма результатів ПЛР аналізу присутності генів nptII (1-3), rolB (4-6) та ifn-α2b (7– 9) у трансгенних коренях полину, отриманих з використанням A. rhizogenes з вектором рСВ161: треки 1, 4 та 7 – ДНК контрольних нетрансформованих рослин; треки 2, 3, 5, 6, 8, 9 – ДНК трансгенних коренів; M – маркери]]

У даній роботі досліджували можливість отримання «бородатих» коренів Artemisia vulgaris з використанням дикого штаму Agrobacterium rhizogenes А4 та Agrobacterium rhizogenes з вектором рСВ161, що несе гени nptII та ifn-α2b.

===Результати та обговорення===

Ріст коренів після генетичної трансформації починався на листових експлантах через 7 діб після кокультивування з агробактеріями як дикого штаму, так і з агробактеріями з векторною конструкцією рСВ161. Корені відрізнялись високою швидкістю росту на середовищі без додавання регуляторів росту рослин (для коренів, отриманих за допомогою агробактерії з рСВ161, ріст продовжувався на середовищі з селективним антибіотиком – канаміцином), значно галузились та не вростали у середовище. 

Проведені молекулярно-біологічні аналізи підтвердили наявність гена rolB у коренях, отриманих за допомогою агробактерій дикого штаму А4, та генів ifn-α2b і nptII у коренях, отриманих за використанням агробактерій, що несли вектор рСВ161. 

Частота трансформації листових експлантів полину звичайного сягала 100 %, в той час як при використанні коренів у якості експлантів трансгенні «бородаті» корені отримати не вдалось. Отже, при генетичній трансформації доцільно використовувати саме листки в якості експлантів для отримання трансгенних коренів з високою частотою.

===Висновки===
[[Image:Отримання культури «бородатих»... 2015 Рис 2.jpg|450px|thumb|Рис. 2. Електрофореграма результатів ПЛР аналізу присутності генів rolB (4-6) у трансгенних коренях полину, трансформованих диким штамом A. rhizogenes A4; треки 1–9 – ДНК бородатих коренів, 10 – ДНК контрольних нетрансформованих рослин; 11 – плазмідна ДНК; М – маркер]]

Вперше було отримано культуру «бородатих» коренів для Artemisia vulgaris L. з використанням агробактерій, що несли плазміду з геном ifn-α2b. До цього часу роботи з агробактеріальної генетичної трансформації полину звичайного були проведені лише за допомогою диких штамів A. rhizogenes, або з перенесенням репортерних генів, таких як GUS. Визначено оптимальні умови трансформації та показано, що листки є оптимальним типом експланту, за використання якого частота отримання трансгенних коренів становила 100%.

===Джерела===
* ''[[Дробот К.О.]], [[Шаховський А.М.]], [[Матвєєва Н.А.]]'' Отримання культури «бородатих» коренів полину звичайного з геном ifn-α2b людини // Фактори експериментальної еволюції органiзмiв: Зб. наук. пр. / Національна академія наук України, Інститут молекулярної біології і генетикп, Укр. Т-во генетиків і селекціонерів iм. М.I. Вавилова; редкол. / В. А. Кунах (голов. ред.) [та iн.] – К.: Укр. т-во генетиків і селекціонерів ім. М.І. Вавилова, 2015. – Т. 17. – С. 145-147
* Доклад на [[Конференция «Факторы экспериментальной эволюции организмов» / 2015|X Международной научной конференции «Факторы экспериментальной эволюции организмов»]]

[[Category:Полин]]
[[Category:Artemisia vulgаris]]
[[Category:культура «бородатих» коренів]]
[[Category:Agrobacterium rhizogenes]]
[[Category:Дробот К.О.]]
[[Category:Шаховський А.М.]]
[[Category:Матвєєва Н.А.]]

[[Category:Лабораторія адаптаційної біотехнології]]

[[en:Construction of Artemisia vulgaris L. hair root culture with human interferon alpha 2b gene / Drobot K.O. et al. 2015]]