Кучук М.В. (1998) Використання прийомів генетичної інженерії і клітинної біології для отримання нових форм у видів з родини бобових...
(Нова сторінка: ВИКОРИСТАННЯ ПРИЙОМІВ ГЕНЕТИЧНОЇ ІНЖЕНЕРІЇ І КЛІТИННОЇ БІОЛОГІЇ ДЛЯ ОТРИМАННЯ НОВИХ ФОРМ У...) |
|||
Рядок 1: | Рядок 1: | ||
− | |||
ВИКОРИСТАННЯ ПРИЙОМІВ ГЕНЕТИЧНОЇ ІНЖЕНЕРІЇ І КЛІТИННОЇ БІОЛОГІЇ ДЛЯ ОТРИМАННЯ НОВИХ ФОРМ У ВИДІВ З РОДИНИ БОБОВИХ І ДЕЯКИХ ІНШИХ РОСЛИН. | ВИКОРИСТАННЯ ПРИЙОМІВ ГЕНЕТИЧНОЇ ІНЖЕНЕРІЇ І КЛІТИННОЇ БІОЛОГІЇ ДЛЯ ОТРИМАННЯ НОВИХ ФОРМ У ВИДІВ З РОДИНИ БОБОВИХ І ДЕЯКИХ ІНШИХ РОСЛИН. | ||
+ | |||
+ | Дисертація у вигляді рукопису на здобуття наукового ступеня доктора біологічних наук за спеціальностями 03.00.22 «Клітинна біологія», 03.00.15 «Генетика». Інститут клітинної біології та генетичної інженерії, Київ 1998. | ||
+ | Розроблено методику культивування протопластів і регенерації рослин у люцер-ни, конюшини, гороху і у Oenothera hookeri. Протопласти сої, люпину, голу-биного гороху при використанні розроблених методів культивування здатні до утворення клітинних колоній з високим ступенем ефективності. Отримано канаміцинстійкі рослини люцерни і клітинні лінії сої та гороху шляхом електро-порації протопластів. Запропоновано метод, що підвищує ефективність транс-формації у гороху та люцерни - «подвійна трансформація», що включає 1) отри-мання лінії рослин, які здатні до регенерації в культурі in vitro, за рахунок транс-формації мутантом «shooty» A. tumefaciens pGV2206; 2) - трансформація ліній, які здатні до регенерації, селективним геном. Таким шляхом було отримано регене-раційні лінії люцерни і гороху і далі трансгенні рослини гороху з Ds транспо-зоном кукурудзи та з геном стійкості до фосфінотрицину. Присутність генів в геномі рослин було доказано за допомогою методів полімеразної ланцюгової реакції, блот- гібридизації за Саузерном, NPT II аналізу, аналізу GUS активності, імуноферментного аналізу (ELISA). Міжвидові соматичні гібриди Medicago sativa +M.varia і M.borealis+ M.lupulina були отримані за допомогою асиметричної гіб-ридизації. Хромосомний аналіз та блот-гібридизація рибосомальної ДНК підт-вердили гібридну природу отриманих ліній. Було проведено гістологічний аналіз процесу регенерації у конюшини, гороху та цукрового буряка. | ||
+ | |||
+ | Ключові слова: бобові, цукровий буряк, Oenothera, протопласт, регенерація рослин, генетична трансформація, соматична гібридизація. | ||
+ | |||
+ | [[Media:Kuchuk1998.pdf|Повний текст]] | ||
+ | |||
+ | |||
+ | [[Категорія:Публікації|1998]] | ||
+ | [[Категорія:Публікації 1998|Кучук МВ]] | ||
+ | [[Категорія:Автореферати|1998]] | ||
+ | [[Категорія:Автореферати (PDF) / Бібліотека|Кучук МВ]] | ||
+ | [[Категорія:Кучук МВ Публікації|1998]] |
Версія за 01:13, 25 січня 2015
ВИКОРИСТАННЯ ПРИЙОМІВ ГЕНЕТИЧНОЇ ІНЖЕНЕРІЇ І КЛІТИННОЇ БІОЛОГІЇ ДЛЯ ОТРИМАННЯ НОВИХ ФОРМ У ВИДІВ З РОДИНИ БОБОВИХ І ДЕЯКИХ ІНШИХ РОСЛИН.
Дисертація у вигляді рукопису на здобуття наукового ступеня доктора біологічних наук за спеціальностями 03.00.22 «Клітинна біологія», 03.00.15 «Генетика». Інститут клітинної біології та генетичної інженерії, Київ 1998. Розроблено методику культивування протопластів і регенерації рослин у люцер-ни, конюшини, гороху і у Oenothera hookeri. Протопласти сої, люпину, голу-биного гороху при використанні розроблених методів культивування здатні до утворення клітинних колоній з високим ступенем ефективності. Отримано канаміцинстійкі рослини люцерни і клітинні лінії сої та гороху шляхом електро-порації протопластів. Запропоновано метод, що підвищує ефективність транс-формації у гороху та люцерни - «подвійна трансформація», що включає 1) отри-мання лінії рослин, які здатні до регенерації в культурі in vitro, за рахунок транс-формації мутантом «shooty» A. tumefaciens pGV2206; 2) - трансформація ліній, які здатні до регенерації, селективним геном. Таким шляхом було отримано регене-раційні лінії люцерни і гороху і далі трансгенні рослини гороху з Ds транспо-зоном кукурудзи та з геном стійкості до фосфінотрицину. Присутність генів в геномі рослин було доказано за допомогою методів полімеразної ланцюгової реакції, блот- гібридизації за Саузерном, NPT II аналізу, аналізу GUS активності, імуноферментного аналізу (ELISA). Міжвидові соматичні гібриди Medicago sativa +M.varia і M.borealis+ M.lupulina були отримані за допомогою асиметричної гіб-ридизації. Хромосомний аналіз та блот-гібридизація рибосомальної ДНК підт-вердили гібридну природу отриманих ліній. Було проведено гістологічний аналіз процесу регенерації у конюшини, гороху та цукрового буряка.
Ключові слова: бобові, цукровий буряк, Oenothera, протопласт, регенерація рослин, генетична трансформація, соматична гібридизація.