Сіндаровська Я. Р. (2009) Agrobacterium-опосередкована транзієнтна експресія...
(Нова сторінка: Agrobacterium-опосередкована транзієнтна експресія генів рекомбінантних білків (GFP, β-глюкуронідаз...) |
м («Сіндаровська Я. Р. 2009 Agrobacterium-опосередкована транзієнтна експресія» перейменовано на «[[Сіндаровська Я. Р. (2009) Agrobacterium-опосередкована тр) |
||
| (3 проміжні версії одного користувача не показані) | |||
| Рядок 1: | Рядок 1: | ||
| − | Agrobacterium-опосередкована транзієнтна експресія генів рекомбінантних білків (GFP, β-глюкуронідази та інтерферону альфа 2b) в рослинах роду Nicotiana L. | + | [[Сіндаровська Я.Р.]](2009) Agrobacterium-опосередкована транзієнтна експресія генів рекомбінантних білків (GFP, β-глюкуронідази та інтерферону альфа 2b) в рослинах роду Nicotiana L. |
| + | Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.20 – біотехнологія. | ||
| + | |||
| + | Дисертація присвячена розробці протоколу отримання рекомбінантних білків шляхом Agrobacterium-опосередкованої транзієнтної експресії відповідних трансгенів. Розроблено протокол для транзієнтної експресії генів чужорідних білків, що знаходились в генетичних конструкціях різних типів, у рослинах роду Nicotiana, досліджено вплив ряду біологічних факторів на рівень накопичення рекомбінантних білків. Показано, що важливе значення для отримання цільових білків методом Agrobacterium-опосередкованої транзієнтної експресії має вид рослини-продуцента. Серед австралійських представників роду Nicotiana нами були відібрані види рослин, які демонстрували високий вміст накопичення репортерного білка GFP при використанні векторних конструкцій різних типів. В результаті трансформації експлантів N. benthamiana бактерією A. rhizogenes було отримано трансгенну кореневу культуру “hairy roots”, регенеровано з неї рослини та проведено оцінку трансгенних рослини. Продемонстровано, що вміст репортерного білка залежить від стадії розвитку рослини та віку листків, в яких відбувається транзієнтна експресія. Доведено, що супресор сайленсингу генів р19 збільшує вміст репортерного білка GFP, ген якого входить до складу модульної рекомбіназної векторної системи експресії. Показано, що фітогормони (ауксини, цитокінин) в різних концентраціях, метилжасмонат та інгібітори його біосинтезу не впливають на накопичення репортерного білка при транзієнтній експресії. Було розроблено методику двох-стадійного очищення репортерного білка GFP з рослинного екстракту. Було показано транзієнтну експресію гена uidA (кодує білок β-глюкуронідазу) в рослинах видів N. excelsior та N. cavicola і продемонстровано активність даного ферменту. Було отримано інтерферон альфа 2b людини в рослинах виду N. excelsior шляхом транзієнтної експресії гена та доведено біологічну активність даного білка. | ||
| + | Ключові слова: Agrobacterium-опосередкована транзієнтна експресія, рекомбінантні білки, Nicotiana benthamiana, Nicotiana excelsior, GFP, інтерферон альфа 2b людини, Agrobacterium rhizogenes, генетична трансформація. | ||
| + | |||
| + | |||
| + | [[Media:Sindarovska.pdf|Повний текст]] | ||
| + | |||
| + | |||
| + | [[Категорія:Публікації|2009]] | ||
| + | [[Категорія:Публікації 2009|Сіндаровська ЯР]] | ||
| + | [[Категорія:Автореферати|2009]] | ||
| + | [[Категорія:Автореферати (PDF) / Бібліотека|Сіндаровська ЯР]] | ||
| + | [[Категорія:Сіндаровська ЯР Публікації|2009]] | ||
Поточна версія на 14:49, 25 січня 2015
Сіндаровська Я.Р.(2009) Agrobacterium-опосередкована транзієнтна експресія генів рекомбінантних білків (GFP, β-глюкуронідази та інтерферону альфа 2b) в рослинах роду Nicotiana L. Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.20 – біотехнологія.
Дисертація присвячена розробці протоколу отримання рекомбінантних білків шляхом Agrobacterium-опосередкованої транзієнтної експресії відповідних трансгенів. Розроблено протокол для транзієнтної експресії генів чужорідних білків, що знаходились в генетичних конструкціях різних типів, у рослинах роду Nicotiana, досліджено вплив ряду біологічних факторів на рівень накопичення рекомбінантних білків. Показано, що важливе значення для отримання цільових білків методом Agrobacterium-опосередкованої транзієнтної експресії має вид рослини-продуцента. Серед австралійських представників роду Nicotiana нами були відібрані види рослин, які демонстрували високий вміст накопичення репортерного білка GFP при використанні векторних конструкцій різних типів. В результаті трансформації експлантів N. benthamiana бактерією A. rhizogenes було отримано трансгенну кореневу культуру “hairy roots”, регенеровано з неї рослини та проведено оцінку трансгенних рослини. Продемонстровано, що вміст репортерного білка залежить від стадії розвитку рослини та віку листків, в яких відбувається транзієнтна експресія. Доведено, що супресор сайленсингу генів р19 збільшує вміст репортерного білка GFP, ген якого входить до складу модульної рекомбіназної векторної системи експресії. Показано, що фітогормони (ауксини, цитокінин) в різних концентраціях, метилжасмонат та інгібітори його біосинтезу не впливають на накопичення репортерного білка при транзієнтній експресії. Було розроблено методику двох-стадійного очищення репортерного білка GFP з рослинного екстракту. Було показано транзієнтну експресію гена uidA (кодує білок β-глюкуронідазу) в рослинах видів N. excelsior та N. cavicola і продемонстровано активність даного ферменту. Було отримано інтерферон альфа 2b людини в рослинах виду N. excelsior шляхом транзієнтної експресії гена та доведено біологічну активність даного білка. Ключові слова: Agrobacterium-опосередкована транзієнтна експресія, рекомбінантні білки, Nicotiana benthamiana, Nicotiana excelsior, GFP, інтерферон альфа 2b людини, Agrobacterium rhizogenes, генетична трансформація.
